alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416366

Descripción general

ATP1A3 codifica la subunidad catalítica alfa 3 de la ATPasa transportadora de Na⁺/K⁺, una ATPasa de tipo P de la membrana plasmática que utiliza la hidrólisis de ATP para mantener los gradientes transmembrana de Na⁺ y K⁺. Al modelar el potencial de membrana en reposo, la recuperación del potencial de acción y el transporte secundario, ATP1A3 influye en la excitabilidad neuronal, la homeostasis iónica y el acoplamiento energético en tejidos excitables. Su actividad se integra con procesos como la transmisión sináptica, el manejo del calcio y las respuestas celulares al estrés, que dependen de gradientes electroquímicos. Las alteraciones genéticas y funcionales de ATP1A3 se asocian a fenotipos de enfermedades neurológicas, lo que la convierte en un punto de interés para investigar mecanismos de neurofisiología y disfunción del transporte iónico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ATP1A3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ATP1A3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ATP1A3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ATP1A3 para la investigación de la señalización de alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ATP1A3 críticos para la función de alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ATP1A3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ATP1A3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 (h) y el plásmido HDR alpha 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1A3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ATP1A3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ATP1A3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.