Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406326

Descripción general

El gen humano **ALDH8A1** codifica la aldehído deshidrogenasa 8-A1, una enzima dependiente de **NAD(P)+** que oxida aldehídos reactivos a sus ácidos correspondientes, contribuyendo a la desintoxicación celular de aldehídos y a la homeostasis redox. La actividad de **ALDH8A1** se integra en vías metabólicas que manejan aldehídos derivados de la peroxidación lipídica y en respuestas más amplias al estrés por carbonilos, ayudando a limitar la formación de aductos de proteínas y ADN mediada por aldehídos. La desregulación de enzimas de la familia de las aldehído deshidrogenasas se asocia con una tolerancia alterada al estrés oxidativo, reprogramación metabólica y mayor vulnerabilidad al daño por electrófilos en múltiples contextos patológicos. En investigación biomédica, **ALDH8A1** se estudia por su impacto en el metabolismo mitocondrial y citosólico, la señalización de estrés y la aptitud celular en condiciones que elevan la carga endógena de aldehídos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ALDH8A1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ALDH8A1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ALDH8A1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ALDH8A1 para la investigación de la señalización de Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ALDH8A1 críticos para la función de Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ALDH8A1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ALDH8A1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 (h) y el plásmido HDR Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ALDH8A1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ALDH8A1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.