Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 (m): sc-419080
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 Antibody (G-2): sc-376089
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 (m) | sc-419080 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Aldh3a1 code l’aldéhyde déshydrogénase 3-A1 (ALDH3A1), une enzyme dépendante du NAD(P)+ qui oxyde des aldéhydes aliphatiques et aromatiques réactifs générés lors de la peroxydation lipidique et du métabolisme des xénobiotiques. En détoxifiant les aldéhydes électrophiles et en contribuant à l’homéostasie rédox, ALDH3A1 soutient les défenses cellulaires contre le stress oxydatif et le stress carbonylé, et s’inscrit dans des voies de réponse au stress liées au glutathion. Dans les tissus murins, l’activité d’ALDH3A1 a été associée à la protection des compartiments épithéliaux exposés à des agressions environnementales et métaboliques, ce qui éclaire des études sur l’inflammation, le stress lié au vieillissement et la carcinogenèse, où la charge en aldéhydes est accrue. Les altérations de la fonction de la famille ALDH sont fréquemment examinées dans des modèles de dysfonctionnement métabolique et de biologie tumorale en raison de leur impact sur la capacité de détoxification et la tolérance cellulaire au stress.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Aldh3a1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Aldh3a1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Aldh3a1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Aldh3a1 pour l'étude de la signalisation de Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Aldh3a1 essentiels à la fonction de Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Aldh3a1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Aldh3a1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 plasmide HDR (m) et le Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Aldh3a1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Aldh3a1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.