Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) AIM2: sc-436414-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)AIM2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa AIM2 (m) y el plásmido de doble nickasa AIM2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Aim2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AIM2 Anticuerpo (3C4G11): sc-293174
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) AIM2 | sc-436414-NIC | 20 µg | $410.00 |
AIM2 (absent in melanoma 2) de ratón es un sensor citosólico de ADN bicatenario que inicia la señalización inmunitaria innata al ensamblar el inflamasoma AIM2 con ASC, lo que conduce a la activación de la caspasa-1 y a la maduración de IL-1β e IL-18. A través de la piroptosis dependiente del inflamasoma y de la liberación de citocinas, AIM2 modela la defensa antimicrobiana y regula el tono inflamatorio en compartimentos mieloides y epiteliales. La actividad de AIM2 se cruza con vías de respuesta al daño del ADN y a la interacción huésped–patógeno, e influye en las respuestas al ADN citosólico procedente de microbios o de células dañadas. La desregulación de la señalización del inflamasoma AIM2 se ha implicado en fenotipos inflamatorios y autoinmunes, así como en la inflamación asociada a tumores, en modelos preclínicos.
AIM2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Aim2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Aim2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Aim2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Aim2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.