AIM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410680

Descripción general

AIM1 (absent in melanoma 1) codifica una proteína asociada al citoesqueleto implicada en la organización de estructuras ricas en actina y en el mantenimiento de la arquitectura celular. Se ha relacionado con la regulación de la forma celular, la adhesión y el comportamiento migratorio a través de efectos sobre la dinámica del citoesqueleto y las redes de señalización asociadas. Se han descrito alteraciones en la expresión de AIM1 o disrupciones genómicas en múltiples tipos de tumores, lo que respalda su uso como diana de investigación en estudios sobre transformación, invasión y fenotipos metastásicos. AIM1 también se estudia en el contexto de la diferenciación de linaje y la organización tisular, donde la remodelación del citoesqueleto es clave para las transiciones del estado celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO AIM1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen AIM1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del AIM1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de AIM1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AIM1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en AIM1 para la investigación de la señalización de AIM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de AIM1 críticos para la función de AIM1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de AIM1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido AIM1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido AIM1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus AIM1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AIM1 (h) y el plásmido HDR AIM1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología AIM1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana AIM1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.