Plásmido Doble Nickase (h) Ah Receptor: sc-400297-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ah Receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ah Receptor (h) y el plásmido de doble nickasa Ah Receptor (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AHR. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Ah Receptor Anticuerpo (A-3): sc-133088
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ah Receptor | sc-400297-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Ah Receptor | sc-400297-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El AHR humano codifica el receptor de hidrocarburos de arilo (receptor Ah), un factor de transcripción activado por ligando que detecta xenobióticos y metabolitos endógenos para regular programas de expresión génica que controlan la desintoxicación, la función de barrera y la modulación inmunitaria. Tras la unión del ligando, AHR se transloca al núcleo, forma un heterodímero con ARNT y se une a elementos de respuesta a xenobióticos para inducir dianas como CYP1A1 y CYP1B1, conectando con respuestas al estrés oxidativo y con la señalización inflamatoria. La actividad de AHR se integra con vías como NF-κB, WNT/β-catenina y TGF-β, influyendo en el control del ciclo celular, la diferenciación y la homeostasis tisular. La señalización desregulada de AHR se ha implicado en una biología tumoral dependiente del contexto, en estados inflamatorios crónicos y en respuestas alteradas a exposiciones ambientales, lo que respalda su utilidad como nodo mecanístico en la investigación en toxicología e inmunología.
Ah Receptor El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AHR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AHR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AHR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AHR alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.