Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418999

Descripción general

Adcy9 codifica la adenilato ciclasa 9 (AC9/ADCY9), una enzima asociada a membrana que convierte ATP en AMPc en respuesta a la señalización acoplada a receptores GPCR, modulando la dinámica compartimentalizada de este segundo mensajero. El AMPc derivado de AC9 regula las vías dependientes de la proteína quinasa A y de EPAC, que influyen en redes de fosforilación, transcripción génica, transporte iónico y adaptación metabólica. En células de ratón, la actividad de ADCY9 contribuye a salidas de señalización específicas del estímulo y al “cross-talk” con procesos mediados por calcio y proteínas G. La desregulación de la señalización por AMPc y la alteración de la función de ADCY9 se han asociado con fenotipos relevantes para la regulación cardiometabólica, la biología de las vías respiratorias y las rutas neuroconductuales, lo que convierte a Adcy9 en un nodo útil para estudios mecanísticos de transducción de señales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adcy9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adcy9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adcy9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adcy9 para la investigación de la señalización de Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adcy9 críticos para la función de Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adcy9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adcy9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 (m) y el plásmido HDR Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adcy9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adcy9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.