Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402004-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADCY8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8 Anticorpo (B-6): sc-377323
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402004-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402004-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ADCY8 humano codifica a adenilato ciclase 8 (AC8), uma enzima ligada à membrana, estimulada por Ca2+/calmodulina, que converte ATP em cAMP e acopla sinais de cálcio à produção de segundos mensageiros. O cAMP gerado pela AC8 ativa PKA, EPAC e vias mediadas por canais regulados por nucleotídeos cíclicos, modulando a transcrição dependente de CREB, a plasticidade sináptica e o acoplamento estímulo-secreção em tecidos excitáveis. Por meio da integração de entradas de GPCRs e da dinâmica intracelular de Ca2+, o ADCY8 contribui para a regulação da sinalização neuronal, das respostas endócrinas e da homeostase celular adaptativa. Alterações na expressão ou na sinalização de ADCY8 têm sido implicadas em fenótipos neuropsiquiátricos e cognitivos e são estudadas no contexto da desregulação da sinalização por cAMP observada em pesquisas sobre doenças neurológicas e metabólicas.
Adenylate cyclase 8/AC8/ADCY8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADCY8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADCY8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADCY8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADCY8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.