Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403213

Descripción general

ADCY7 codifica la adenilato ciclasa 7 (AC7), una enzima asociada a la membrana que convierte ATP en AMP cíclico, un segundo mensajero que controla la señalización de la proteína quinasa A y EPAC, programas de transcripción y la regulación por retroalimentación de las respuestas inmunitarias e inflamatorias. AC7 actúa aguas abajo de receptores acoplados a proteínas G a través de Gαs y está modulada por Gβγ y otras señales reguladoras, dando forma a dinámicas de AMPc específicas según el estímulo. En células humanas, la señalización de AMPc dependiente de ADCY7 influye en la producción de citocinas, la activación de leucocitos y las respuestas al estrés celular, vinculando este nodo con vías relevantes para la inflamación y la defensa del huésped. La variación genética o la regulación alterada de enzimas generadoras de AMPc se ha asociado con susceptibilidad a fenotipos inflamatorios y metabólicos, lo que respalda estudios mecanísticos de AC7 en contextos celulares relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADCY7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADCY7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADCY7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADCY7 para la investigación de la señalización de Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADCY7 críticos para la función de Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADCY7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADCY7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 (h) y el plásmido HDR Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADCY7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADCY7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.