Plásmido Doble Nickase (h) Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5: sc-401391-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 (h) y el plásmido de doble nickasa Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ADCY5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 | sc-401391-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 | sc-401391-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADCY5 codifica la adenilato ciclasa 5 (AC5), una enzima asociada a la membrana que convierte ATP en AMP cíclico (cAMP), modulando la señalización de segundos mensajeros aguas abajo de los GPCR. AC5 se vincula de forma destacada a vías reguladas por Gαs/Gαi que modulan programas de fosforilación dependientes de PKA y EPAC, con efectos sobre la excitabilidad neuronal, la plasticidad sináptica y la señalización metabólica. Mediante el control de la dinámica del cAMP, ADCY5 influye en respuestas transcripcionales, la actividad de canales iónicos y la regulación por retroalimentación de la señalización de receptores. Alteraciones genéticas y funcionales de ADCY5 se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y relacionados con el movimiento, lo que respalda su relevancia para estudiar la desregulación de la señalización por cAMP en modelos celulares humanos.
Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ADCY5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ADCY5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ADCY5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ADCY5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.