Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401391-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADCY5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401391-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401391-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADCY5 codifica a adenilato ciclase 5 (AC5), uma enzima associada à membrana que converte ATP em AMP cíclico (cAMP), moldando a sinalização de segundo mensageiro a jusante de GPCRs. A AC5 está fortemente ligada a vias reguladas por Gαs/Gαi, que modulam programas de fosforilação dependentes de PKA e EPAC, afetando a excitabilidade neuronal, a plasticidade sináptica e a sinalização metabólica. Ao controlar a dinâmica do cAMP, a ADCY5 influencia respostas transcricionais, a atividade de canais iônicos e a regulação por retroalimentação da sinalização dos receptores. Alterações genéticas e funcionais em ADCY5 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e relacionados ao movimento, reforçando sua relevância para o estudo da sinalização de cAMP desregulada em modelos celulares humanos.
Adenylate cyclase 5/AC5/ADCY5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADCY5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADCY5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADCY5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADCY5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.