Plasmide Double Nickase (h) Adenosine A3-R: sc-402007-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Adenosine A3-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Adenosine A3-R Double Nickase (h) et le plasmide Adenosine A3-R Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADORA3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Adenosine A3-R | sc-402007-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Adenosine A3-R | sc-402007-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADORA3 code le récepteur humain de l’adénosine A3 (A3-R), un RCPG couplé à Gi/o qui détecte l’adénosine extracellulaire et module les niveaux intracellulaires d’AMPc, tout en mobilisant des voies de signalisation dépendantes de MAPK/ERK, PI3K–AKT et de la PLC. L’activité d’A3-R façonne la chimiotaxie et les fonctions effectrices des cellules immunitaires, influence les réponses vasculaires et épithéliales, et peut affecter les programmes de survie cellulaire en conditions d’hypoxie ou de stress inflammatoire où l’adénosine s’accumule. Par ces voies, ADORA3 est fréquemment étudié dans des contextes tels que l’inflammation, la fibrose, la signalisation liée à l’ischémie et la biologie du microenvironnement tumoral, où la signalisation purinergique contribue à la régulation immunitaire et à l’adaptation au stress.
Adenosine A3-R Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADORA3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADORA3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADORA3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADORA3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.