Adenosine A2B-R Plasmide Double Nickase (m): sc-419015-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Adenosine A2B-R Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Adenosine A2B-R Double Nickase Plasmid (m) e il Adenosine A2B-R Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Adora2b. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Adenosine A2B-R Plasmide Double Nickase (m) | sc-419015-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenosine A2B-R Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419015-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adora2b codifica il recettore dell’adenosina A2B del topo (Adenosine A2B-R), un recettore accoppiato a proteine G che rileva l’adenosina extracellulare generata durante stress metabolico e infiammazione. A2B-R si accoppia principalmente alle vie di segnalazione Gs e Gq per regolare i pathway cAMP/PKA e PLC–Ca²⁺, modulando a valle cascate di chinasi e programmi trascrizionali che influenzano la funzione di barriera, la produzione di citochine e il tono vascolare. Nei compartimenti immunitario e stromale, la segnalazione di A2B-R modula il traffico leucocitario, l’attivazione mieloide e le risposte dei fibroblasti, integrando segnali purinergici con reti associate a ipossia e infiammazione. Un’attività deregolata di ADORA2B è stata implicata in processi infiammatori e fibrotici, nel rimodellamento tissutale associato all’ischemia e nella segnalazione del microambiente tumorale, rendendolo rilevante per studi meccanicistici della regolazione purinergica in modelli di malattia.
Adenosine A2B-R Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Adora2b nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Adora2b. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Adora2b. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Adora2b interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.