ADAR1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401611-LAC

ADAR (ADAR1) kodiert eine Adenosin-Desaminase, die A‑zu‑I‑RNA-Editierung in doppelsträngiger RNA katalysiert und dadurch Transkriptsequenzen, Spleißvorgänge sowie strukturabhängige RNA-Interaktionen verändert. Durch die Editierung endogener dsRNA begrenzt ADAR1 eine fehlgeleitete angeborene Immunaktivierung, indem es die Erkennung durch zytosolische RNA-Sensoren verringert, und moduliert so die Typ‑I‑Interferon-Signalübertragung und inflammatorische Genprogramme. ADAR1 beeinflusst außerdem die microRNA-Prozessierung und das Recoding ausgewählter Transkripte, was Entscheidungen über Zellschicksal und Stressantworten mitprägt. Eine dysregulierte ADAR1-Aktivität und veränderte RNA-Editierungslandschaften wurden mit modifizierten antiviralen Antworten und entzündlicher Pathobiologie sowie mit krebsassoziiertem Transcriptom-Remodeling in Verbindung gebracht.

ADAR1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ADAR-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ADAR1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ADAR-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ADAR1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ADAR-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.