Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ADAM9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418994
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ADAM9 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ADAM9, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ADAM9 Anticuerpo (G-1): sc-377233
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ADAM9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418994 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Adam9 codifica ADAM9, una metaloproteasa-disintegrina anclada a la membrana que media el desprendimiento del ectodominio (ectodomain shedding) de proteínas de la superficie celular y contribuye a la remodelación de la matriz extracelular. Mediante el procesamiento proteolítico de receptores, moléculas de adhesión y precursores de factores de crecimiento, ADAM9 modula redes de señalización como las vías relacionadas con EGFR/ErbB, la adhesión dependiente de integrinas y las respuestas migratorias. En sistemas murinos, ADAM9 se ha vinculado con la regulación de la inflamación, las respuestas a lesión tisular y procesos del microambiente asociados a tumores, por lo que resulta relevante para estudios de fibrosis, neuroinflamación y biología del cáncer. Su actividad influye en la comunicación célula–célula y en cascadas de proteasas que moldean las interacciones epitelio–estroma y el tráfico de células inmunitarias.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAM9 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adam9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adam9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adam9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAM9.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adam9 para la investigación de la señalización de ADAM9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Adam9 críticos para la función de ADAM9
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adam9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ADAM9 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ADAM9 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adam9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAM9 (m) y el plásmido HDR ADAM9 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adam9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adam9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.