ADAM22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405581

Übersicht

ADAM22 kodiert ein Protein mit Disintegrin- und Metalloprotease-Domäne, das zwar katalytisch inaktiv ist, im Nervensystem jedoch als Zelloberflächen-Adhäsions- und Signalgerüst (Scaffold) fungiert. Es interagiert mit Liganden der LGI-Familie und trägt über die Modulation von Membranproteinkomplexen zur Organisation synaptischer Kontakte, zur neuronalen Erregbarkeit und zur Kommunikation zwischen Axon und Glia bei. ADAM22-assoziierte Netzwerke überschneiden sich mit Signalwegen, die die Synapsenreifung, die Clusterbildung von Ionenkanälen und extrazellulärmatrix-gekoppelte Signalübertragung steuern. Eine Fehlregulation der ADAM22-Expression oder des Zusammenbaus seiner Komplexe wurde mit neurologischen Phänotypen in Verbindung gebracht und wird im Kontext synaptischer Dysfunktion sowie damit verknüpfter neuroentwicklungsbedingter oder neuropsychiatrischer Krankheitsmechanismen untersucht.

Das ADAM22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADAM22-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADAM22-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADAM22 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ADAM22-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADAM22-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ADAM22-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADAM22-Exone abzielen, die für die ADAM22-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADAM22-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ADAM22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ADAM22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADAM22-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ADAM22 HDR-Plasmid (h) und ADAM22 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADAM22-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADAM22-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.