Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ADAM15 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405627
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ADAM15 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ADAM15, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ADAM15 Antibody (D-5): sc-365752
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ADAM15 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405627 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
ADAM15 codifica una metalloproteasi-disintegrina transmembrana che partecipa allo shedding dell’ectodominio e alle interazioni cellula–cellula/cellula–matrice attraverso i suoi domini proteasico, disintegrina e citoplasmatico. Modula reti di segnalazione legate all’adesione e alla motilità, incluse le vie associate alle integrine, e può influenzare la disponibilità di ligandi e recettori ancorati alla membrana tramite proteolisi regolata. L’attività di ADAM15 è stata collegata a processi quali migrazione, invasione e segnalazione infiammatoria, e un’alterata espressione è stata riportata in molteplici contesti patologici, tra cui la progressione tumorale e la patologia vascolare. In quanto proteasi associata alla superficie cellulare, ADAM15 è spesso studiata per il suo contributo al rimodellamento extracellulare e al crosstalk della trasduzione del segnale a livello della membrana plasmatica.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM15 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ADAM15 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ADAM15 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ADAM15 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ADAM15.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ADAM15 per lo studio della segnalazione di ADAM15, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ADAM15 critici per la funzione di ADAM15
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ADAM15 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ADAM15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ADAM15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ADAM15. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ADAM15 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ADAM15 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ADAM15 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ADAM15 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.