Plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM11 (m): sc-418982

Présentation

Adam11 code ADAM11, une protéine de la famille ADAM de type désintégrine, catalytiquement inactive, impliquée dans les interactions cellule–cellule et cellule–matrice, avec des rôles importants dans le système nerveux. ADAM11 est associée à des processus tels que la différenciation neuronale, l’organisation des synapses et la modulation de la signalisation dépendante de l’adhérence via ses domaines extracellulaires. Une expression altérée d’ADAM11 ainsi que des modifications génomiques ont été rapportées dans des études portant sur des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs, et elle est également étudiée dans le contexte de la biologie tumorale, où les programmes d’adhérence et de migration sont dérégulés. En tant que gène murin, Adam11 constitue un système abordable pour disséquer des mécanismes conservés médiés par les ADAM dans les circuits neuronaux et le remodelage tissulaire.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM11 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Adam11 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Adam11, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Adam11 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ADAM11.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Adam11 pour l'étude de la signalisation de ADAM11, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Adam11 essentiels à la fonction de ADAM11
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Adam11 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le ADAM11 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ADAM11 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Adam11. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le ADAM11 plasmide HDR (m) et le ADAM11 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Adam11 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Adam11 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.