Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) ACTR-IIB: sc-401414-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ACTR-IIB consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ACTR-IIB (h) y el plásmido de doble nickasa ACTR-IIB (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ACVR2B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ACTR-IIB Anticuerpo (G-7): sc-376593
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ACTR-IIB | sc-401414-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ACTR-IIB | sc-401414-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACVR2B codifica el receptor de activina tipo IIB (ACTR-IIB), un receptor transmembrana con actividad quinasa de serina/treonina de la superfamilia TGF-β que se une a activinas, miostatina (GDF8) y ligandos relacionados. Tras la unión del ligando, ACTR-IIB forma complejos con receptores de tipo I para activar la señalización SMAD2/3 y modular programas transcripcionales que controlan la proliferación, la diferenciación y la homeostasis tisular. Este eje es un regulador central del músculo esquelético y de la biología metabólica, y también influye en la señalización reproductiva e inflamatoria a través de las vías de activina. La desregulación de la señalización ACVR2B/ACTR-IIB se ha asociado con fenotipos de masa muscular alterada, procesos relacionados con la fibrosis y contextos de biología tumoral, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios centrados en vías.
ACTR-IIB El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ACVR2B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ACVR2B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ACVR2B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ACVR2B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.