Plásmido Doble Nickase (h) ACSVL1: sc-405122-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ACSVL1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ACSVL1 (h) y el plásmido de doble nickasa ACSVL1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC27A2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ACSVL1 Anticuerpo (D-7): sc-393906
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ACSVL1 | sc-405122-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ACSVL1 | sc-405122-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC27A2 codifica la acil-CoA sintetasa de ácidos grasos de cadena muy larga 1 (ACSVL1/FATP2), una enzima asociada a membrana que activa ácidos grasos de cadena larga y muy larga convirtiéndolos en tioésteres de acil-CoA, lo que permite dirigirlos hacia la β-oxidación, la síntesis de lípidos complejos y la remodelación lipídica. Al controlar la captación de ácidos grasos y su activación intracelular, ACSVL1 influye en el metabolismo lipídico mitocondrial y peroxisomal, la homeostasis energética y las respuestas celulares a la disponibilidad de nutrientes. La alteración del manejo de ácidos grasos en el que participa SLC27A2 se ha estudiado en fenotipos metabólicos como la esteatosis hepática y la resistencia a la insulina, así como en programas de metabolismo lipídico modificados relevantes para la inflamación y la bioenergética de células tumorales. Estas propiedades hacen de ACSVL1 un nodo útil para analizar la señalización impulsada por lípidos y la reprogramación metabólica en modelos celulares humanos.
ACSVL1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC27A2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC27A2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC27A2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC27A2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.