Plásmido Doble Nickase (h) ACSL3: sc-403546-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ACSL3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ACSL3 (h) y el plásmido de doble nickasa ACSL3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ACSL3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ACSL3 Anticuerpo (H-9): sc-166374
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ACSL3 | sc-403546-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ACSL3 | sc-403546-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACSL3 (miembro 3 de la familia de sintetasas de acil‑CoA de cadena larga) es una enzima asociada al retículo endoplásmico que activa los ácidos grasos de cadena larga convirtiéndolos en tioésteres de acil‑CoA, un paso necesario para la biosíntesis de lípidos y la utilización de ácidos grasos. Al canalizar los ácidos grasos hacia la producción de fosfolípidos y lípidos neutros, ACSL3 influye en la remodelación de membranas, la biogénesis de gotas lipídicas y programas metabólicos más amplios vinculados al crecimiento celular y la adaptación al estrés. Su actividad se conecta con vías que regulan la captación de ácidos grasos, la homeostasis lipídica del retículo endoplásmico y el suministro de lípidos a la mitocondria, modulando la bioenergética y la disponibilidad de lípidos señalizadores. Se ha investigado la alteración de la regulación de ACSL3 en contextos de reprogramación metabólica, inflamación asociada a lípidos y transformación oncogénica, donde la activación de ácidos grasos puede contribuir a perfiles lipídicos definitorios del fenotipo.
ACSL3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ACSL3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ACSL3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ACSL3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ACSL3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.