Acrp30 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418962
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Acrp30 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Acrp30, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Acrp30 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418962 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Adipoq codifica Acrp30 (adiponectina), una hormona secretada por los adipocitos que circula en forma de multímeros y regula el equilibrio energético sistémico. Acrp30 señala principalmente a través de ADIPOR1/ADIPOR2 para modular las vías de AMPK y PPARα, influyendo en la oxidación de ácidos grasos, la utilización de glucosa y la biogénesis mitocondrial, y puede modelar el tono inflamatorio mediante efectos sobre la señalización asociada a NF-κB. En modelos murinos, la expresión alterada de Adipoq se asocia con disfunción del tejido adiposo, resistencia a la insulina, esteatosis hepática y fenotipos relacionados con la aterosclerosis. Estas propiedades convierten a Adipoq en un nodo clave para estudiar la señalización de adipocinas, el diálogo metabólico entre tejido adiposo e hígado/músculo, y la integración entre inflamación y metabolismo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Acrp30 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adipoq en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adipoq junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adipoq tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Acrp30.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adipoq para la investigación de la señalización de Acrp30, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Adipoq críticos para la función de Acrp30
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adipoq para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Acrp30 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Acrp30 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adipoq. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Acrp30 (m) y el plásmido HDR Acrp30 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adipoq para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adipoq definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.