ACP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404488-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ACP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ACP1 Double Nickase Plasmid (h) e il ACP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ACP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ACP1 Antibody (D-3): sc-390190
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ACP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404488-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404488-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ACP1 umano codifica una fosfatasi tirosinica proteica a basso peso molecolare (LMW-PTP) che defosforila residui di fosfotirosina su proteine di segnalazione chiave, modulando ampiezza e durata delle vie avviate dai recettori. Regolando eventi dipendenti dalla fosforilazione, ACP1 influenza la segnalazione dei recettori per i fattori di crescita, la dinamica del citoscheletro e il comportamento delle reti MAPK e PI3K/AKT a valle, che governano proliferazione, adesione e risposte metaboliche. Studi genetici e funzionali hanno collegato l’attività e le varianti di ACP1 ad alterazioni della segnalazione nelle cellule immunitarie e a fenotipi metabolici, supportandone la rilevanza nella ricerca su infiammazione, segnalazione dell’insulina e rimodellamento delle vie oncogeniche. In quanto nodo fosfatasico che controbilancia l’attività delle chinasi, ACP1 viene spesso analizzato in studi sulla fedeltà della trasduzione del segnale e sull’omeostasi della fosforilazione.
ACP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ACP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ACP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ACP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ACP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.