Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ACLP/AEBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403540
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ACLP/AEBP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ACLP/AEBP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ACLP/AEBP1 Anticuerpo (G-1): sc-271374
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ACLP/AEBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403540 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
AEBP1 codifica la proteína 1 de unión al potenciador de adipocitos, también conocida como ACLP, una proteína asociada a la matriz extracelular implicada en la organización del colágeno, la adhesión célula–matriz y la remodelación tisular. En contextos estromales y similares a fibroblastos, AEBP1 se vincula a vías que regulan la activación mesenquimal, la señalización inflamatoria y el recambio de la matriz extracelular, influyendo en la migración celular y en las propiedades mecánicas de los tejidos. La expresión alterada de AEBP1/ACLP se ha asociado con la remodelación fibrótica y con la biología del microambiente tumoral, donde puede correlacionarse con cambios en la composición del estroma y en la señalización relacionada con el sistema inmunitario. Estas características hacen de AEBP1 una diana útil para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por la matriz y de transiciones de estado celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACLP/AEBP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen AEBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del AEBP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de AEBP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACLP/AEBP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en AEBP1 para la investigación de la señalización de ACLP/AEBP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de AEBP1 críticos para la función de ACLP/AEBP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de AEBP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ACLP/AEBP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ACLP/AEBP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus AEBP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACLP/AEBP1 (h) y el plásmido HDR ACLP/AEBP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología AEBP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana AEBP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.