Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ACLP/AEBP1 (h): sc-403540
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ACLP/AEBP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ACLP/AEBP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACLP/AEBP1 Antibody (G-1): sc-271374
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ACLP/AEBP1 (h) | sc-403540 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
AEBP1 code pour la protéine 1 de liaison aux enhancers des adipocytes, également connue sous le nom d’ACLP, une protéine associée à la matrice extracellulaire impliquée dans l’organisation du collagène, l’adhérence cellule–matrice et le remodelage tissulaire. Dans des contextes stromaux et de type fibroblastique, AEBP1 est liée à des voies qui régulent l’activation mésenchymateuse, la signalisation inflammatoire et le renouvellement de la matrice extracellulaire, influençant la migration cellulaire et les propriétés mécaniques des tissus. Une expression altérée d’AEBP1/ACLP a été associée au remodelage fibrotique et à la biologie du microenvironnement tumoral, où elle peut corréler avec des modifications de la composition du stroma et de la signalisation liée à l’immunité. Ces caractéristiques font d’AEBP1 une cible utile pour des études mécanistiques des phénotypes pilotés par la matrice et des transitions d’état cellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ACLP/AEBP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène AEBP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du AEBP1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert AEBP1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ACLP/AEBP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en AEBP1 pour l'étude de la signalisation de ACLP/AEBP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de AEBP1 essentiels à la fonction de ACLP/AEBP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de AEBP1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ACLP/AEBP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ACLP/AEBP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus AEBP1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ACLP/AEBP1 plasmide HDR (h) et le ACLP/AEBP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie AEBP1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles AEBP1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.