ACBD6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428356

Descripción general

Acbd6 codifica la proteína 6 que contiene un dominio de unión a acil-CoA (ACBD6), una proteína citosólica de unión a lípidos que se asocia con ésteres de acil-CoA de cadena larga y ayuda a coordinar el manejo intracelular de los acil-CoA. Al amortiguar y presentar ácidos grasos activados a enzimas efectoras, ACBD6 está en posición de influir en el flujo metabólico de lípidos, la remodelación de lípidos de membrana y los procesos dependientes de acilación que acoplan el estado nutricional con la función celular. La alteración de la disponibilidad de acil-CoA puede afectar el metabolismo mitocondrial, las respuestas al estrés oxidativo y la señalización inflamatoria, lo que hace que Acbd6 sea relevante para estudios sobre desregulación metabólica y fenotipos celulares impulsados por lípidos. Por ello, ACBD6 en ratón es un punto de partida útil para diseccionar vías reguladas por acil-CoA en tejidos con alto recambio lipídico, como el hígado, el tejido adiposo y las células inmunitarias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACBD6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Acbd6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Acbd6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Acbd6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACBD6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Acbd6 para la investigación de la señalización de ACBD6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Acbd6 críticos para la función de ACBD6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Acbd6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ACBD6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ACBD6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Acbd6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACBD6 (m) y el plásmido HDR ACBD6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Acbd6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Acbd6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.