ABCG1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-418933

Übersicht

Abcg1 kodiert den ATP-bindende-Cassette-Transporter ABCG1, einen zentralen Regulator der intrazellulären Cholesterin- und Phospholipid-Homöostase, der den Sterol-Efflux zu HDL fördert und das Remodeling von Membranlipiden unterstützt. In Makrophagen und anderen lipidverarbeitenden Zellen wirkt ABCG1 nachgeschaltet zur LXR/RXR-Signalgebung und koordiniert sich mit ABCA1, um die Lipidbeladung, die Schaumzellbildung und den Entzündungsstatus zu steuern. Eine veränderte Abcg1-Aktivität wurde in Mausmodellen mit einer gestörten Lipidhomöostase, oxidativen Stressantworten und atheroskleroserelevanten Phänotypen in Verbindung gebracht. Darüber hinaus kann die durch ABCG1 vermittelte Lipidbalance die Funktion von Immunzellen und zelluläre Antworten auf metabolischen Stress beeinflussen.

Das ABCG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Abcg1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Abcg1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Abcg1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ABCG1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Abcg1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ABCG1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Abcg1-Exone abzielen, die für die ABCG1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Abcg1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ABCG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom ABCG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Abcg1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ABCG1 HDR-Plasmid (m) und ABCG1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Abcg1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Abcg1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.