Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO 20S Proteasome α8 (h): sc-414520
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- 20S Proteasome α8 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique 20S Proteasome α8, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: 20S Proteasome α8 Antibody (N-96): sc-130488
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO 20S Proteasome α8 (h) | sc-414520 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PSMA8 code la sous-unité alpha 8 du protéasome 20S, un composant du cœur du protéasome qui contribue au renouvellement régulé des protéines et à la génération de peptides via le système ubiquitine–protéasome. En soutenant l’assemblage du protéasome et sa capacité protéolytique, PSMA8 influence la protéostasie cellulaire, la progression du cycle cellulaire et les réponses adaptatives au stress liées à la signalisation des dommages à l’ADN et au traitement des antigènes. Des perturbations de la voie du protéasome peuvent remodeler des réseaux de signalisation tels que NF-κB et les cascades d’apoptose en modifiant la stabilité de protéines régulatrices clés. Un fonctionnement dérégulé du protéasome est largement impliqué dans la biologie des maladies, notamment les dépendances de protéostasie associées aux cancers et des phénotypes immunitaires liés à une dégradation des protéines et une présentation des peptides altérées.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO 20S Proteasome α8 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PSMA8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PSMA8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PSMA8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine 20S Proteasome α8.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PSMA8 pour l'étude de la signalisation de 20S Proteasome α8, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PSMA8 essentiels à la fonction de 20S Proteasome α8
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PSMA8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le 20S Proteasome α8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le 20S Proteasome α8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PSMA8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le 20S Proteasome α8 plasmide HDR (h) et le 20S Proteasome α8 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PSMA8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PSMA8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.