Plasmide Double Nickase (h) δ-catenin: sc-402493-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) δ-catenin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide δ-catenin Double Nickase (h) et le plasmide δ-catenin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CTNND2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: δ-catenin Antibody (40.1): sc-81793
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) δ-catenin | sc-402493-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) δ-catenin | sc-402493-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTNND2 code la δ-caténine humaine (membre de la famille des p120-caténines), un adaptateur cytoplasmique enrichi au niveau des jonctions d’adhérence, où elle module la stabilité du complexe cadhérine–caténine et relie l’adhésion cellule–cellule à la dynamique du cytosquelette d’actine. La δ-caténine participe à des voies de signalisation qui régulent l’extension des neurites, l’organisation synaptique et la motilité cellulaire, en partie via des interactions avec des régulateurs des GTPases de la famille Rho et des protéines d’échafaudage associées aux jonctions. Une expression altérée de CTNND2 ou des perturbations génomiques ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux, et CTNND2 a également été étudié dans des contextes de plasticité épithéliale et de biologie tumorale, où le remodelage de l’adhérence est un processus clé. Ces caractéristiques font de CTNND2 une cible utile pour étudier la signalisation aux jonctions, la morphogenèse neuronale et les mécanismes couplant l’adhérence à des programmes transcriptionnels et cytosquelettiques.
δ-catenin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CTNND2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CTNND2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CTNND2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CTNND2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.