非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
βB1-结晶素 (H-3): sc-48335. 小鼠 (A) 和大鼠 (B) 眼组织提取物中 βB1-crystallin 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-419827
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- βB3-crystallin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在βB3-crystallin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：βB3-crystallin: sc-374374，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-419827 | 20 µg | $397.00 |
概述
Crybb3 编码 βB3-晶状体蛋白（βB3-crystallin），属于结构性的 β/γ-晶状体蛋白家族，参与构成晶状体纤维细胞的结构框架，维持长程有序排列并保持透明性。βB3-晶状体蛋白参与晶状体蛋白复合体的组装，在晶状体发育与成熟过程中支持蛋白稳定性及折光特性。晶状体蛋白稳态一旦受扰，可能促进蛋白聚集、改变氧化还原平衡并增强晶状体散射光，从而将 Crybb3 与调控蛋白质稳态及晶状体细胞应激反应的相关通路联系起来。在小鼠模型中，晶状体蛋白组成的扰动常用于研究晶状体退变及类白内障表型。
βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Crybb3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Crybb3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Crybb3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使βB3-crystallin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Crybb3缺失的细胞模型，用于βB3-crystallin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 βB3-crystallin 功能至关重要的 Crybb3 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Crybb3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Crybb3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 βB3-crystallin HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 βB3-crystallin HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Crybb3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Crybb3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。