β6 Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400062
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- β6 Tubulin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico β6 Tubulin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
β6 Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400062 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TUBB6 codifica la β6-tubulina humana, un isotipo de β-tubulina que heterodimeriza con la α-tubulina para formar microtúbulos, sosteniendo la arquitectura del citoesqueleto y el transporte intracelular. La dinámica de los microtúbulos, determinada por la composición de isotipos de tubulina, regula el ensamblaje del huso mitótico, la segregación cromosómica y la progresión del ciclo celular, y también determina la polaridad y la motilidad celular. La β6-tubulina participa en vías que controlan el tráfico de vesículas y el posicionamiento de orgánulos mediante interacciones con proteínas asociadas a microtúbulos y complejos motores. La desregulación de las redes de tubulina y del comportamiento de los microtúbulos se asocia con fenotipos proliferativos, inestabilidad cromosómica y programas de migración alterados, relevantes para la biología del cáncer y otros trastornos vinculados al citoesqueleto.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO β6 Tubulin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TUBB6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TUBB6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TUBB6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína β6 Tubulin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TUBB6 para la investigación de la señalización de β6 Tubulin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TUBB6 críticos para la función de β6 Tubulin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TUBB6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido β6 Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido β6 Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TUBB6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR β6 Tubulin (h) y el plásmido HDR β6 Tubulin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TUBB6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TUBB6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.