β-2-Microglobulin Lentiviral Activation Particles (h): sc-417704-LAC

B2M kodiert β-2-Mikroglobulin, die invariante leichte Kette der MHC-Klasse-I-Komplexe, die für die korrekte Faltung, Stabilität und Zelloberflächenpräsentation von HLA-Klasse I erforderlich ist. Indem β-2-Mikroglobulin die Peptidpräsentation an CD8+-T-Zellen ermöglicht, unterstützt es die Signalwege der Antigenverarbeitung und -präsentation und beeinflusst die Immunüberwachung, die Erkennung durch NK-Zellen sowie interferonregulierte Antworten. Eine veränderte B2M-Expression oder -Funktion wird häufig im Zusammenhang mit Mechanismen der Immunflucht, Defekten der Antigenpräsentation und entzündlicher Signalübertragung untersucht. In humanen Modellsystemen ist B2M ein zentraler Ansatzpunkt zur Untersuchung der HLA-Klasse-I-Biologie, der Immunopeptidomik sowie der Interaktionen zwischen Tumor- oder infizierten Zellen und Immun-Effektorzellpopulationen.

β-2-Microglobulin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente B2M-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

β-2-Microglobulin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der B2M-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen β-2-Microglobulin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen B2M-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.