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β-1,4-GalNAc-T4慢病毒激活颗粒(h) | sc-410420-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
β-1,4-GalNAc-T4慢病毒激活颗粒(h2) | sc-410420-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
B4GALNT4 编码 β-1,4-GalNAc-T4,这是一种定位于高尔基体的糖基转移酶,负责将 N-乙酰半乳糖胺转移到糖缀合物上,从而塑造糖蛋白和糖脂末端的碳水化合物结构。通过参与蛋白质与脂质的糖基化,β-1,4-GalNAc-T4 会影响细胞膜的组织、受体运输以及细胞—细胞识别等过程,并与分泌途径功能相互整合。糖基化程序的改变常与复杂疾病中黏附与信号传导的失调相关,因此,B4GALNT4 是用于探究糖链重塑如何影响细胞表型的一个有价值靶点。
β-1,4-GalNAc-T4 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 B4GALNT4 表达。
β-1,4-GalNAc-T4 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在B4GALNT4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性β-1,4-GalNAc-T4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 B4GALNT4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。