Plasmide Double Nickase (h) α-parvin: sc-405769-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α-parvin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α-parvin Double Nickase (h) et le plasmide α-parvin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PARVA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α-parvin | sc-405769-NIC | 20 µg | $410.00 |
PARVA code l’α-parvine, une protéine d’adhérences focales se liant à l’actine, qui s’associe à l’intégrine-linked kinase (ILK) et à PINCH pour former le complexe IPP, reliant la signalisation des intégrines au remodelage du cytosquelette. Par ses interactions avec la paxilline, l’actine et des composants des adhérences focales, l’α-parvine régule l’adhésion cellulaire, l’étalement, la migration et la mécanotransduction, et influence des voies qui contrôlent la forme cellulaire et l’organisation tissulaire. La dynamique d’adhésion dépendante de PARVA est pertinente pour des processus tels que l’angiogenèse et la détection de la matrice extracellulaire, et une expression ou une régulation altérée a été associée dans la littérature à l’invasion des cellules cancéreuses et à des phénotypes liés aux métastases. En tant qu’adaptateur cytosquelettique au niveau des sites d’adhésion, l’α-parvine constitue un point d’entrée utile pour étudier la signalisation médiée par les intégrines et l’architecture de l’actine dans les cellules humaines.
α-parvin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PARVA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PARVA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PARVA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PARVA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.