Plásmido Doble Nickase (h) α3e Tubulin: sc-400023-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)α3e Tubulin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa α3e Tubulin (h) y el plásmido de doble nickasa α3e Tubulin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TUBA3E. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) α3e Tubulin | sc-400023-NIC | 20 µg | $410.00 |
TUBA3E codifica la tubulina α3e, una subunidad de los microtúbulos que se une a la β-tubulina y que sostiene la arquitectura del citoesqueleto, el transporte intracelular y la organización del huso mitótico. Como componente central del polímero de tubulina, la tubulina α3e contribuye a la dinámica de los microtúbulos que sustenta la progresión del ciclo celular, el crecimiento de prolongaciones neuronales y el tráfico polarizado. Las alteraciones en la expresión de isotipos de tubulina o en la estabilidad de los microtúbulos pueden modificar la segregación cromosómica y la motilidad celular, procesos implicados con frecuencia en la inestabilidad genómica y la biología tumoral. Por ello, TUBA3E se estudia en vías relacionadas con la remodelación del citoesqueleto, la mitosis y las respuestas al estrés frente a compuestos dirigidos a los microtúbulos.
α3e Tubulin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TUBA3E en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TUBA3E. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TUBA3E. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TUBA3E alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.