Plásmido Doble Nickase (h) α1b Tubulin: sc-400021-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)α1b Tubulin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa α1b Tubulin (h) y el plásmido de doble nickasa α1b Tubulin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TUBA1B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: α1b Tubulin Anticuerpo (1H10): sc-134238
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) α1b Tubulin | sc-400021-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) α1b Tubulin | sc-400021-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA1B codifica la tubulina α1b, un componente estructural central de los microtúbulos que impulsa la organización del citoesqueleto, el transporte intracelular y la dinámica del huso mitótico. Los heterodímeros de tubulina α/β polimerizan para regular procesos como la segregación cromosómica, la polaridad celular y el tráfico vesicular, y son elementos clave en vías que controlan la progresión del ciclo celular y la señalización dependiente de microtúbulos. Las alteraciones en la expresión de tubulina y en la dinámica de los microtúbulos se asocian con frecuencia a la inestabilidad cromosómica y a la proliferación aberrante, lo que convierte a TUBA1B en un nodo útil para estudiar los mecanismos subyacentes a la biología tumoral y las respuestas al estrés por perturbación del citoesqueleto. Como gen citosquelético de expresión amplia, TUBA1B también sustenta la investigación sobre diferenciación neuronal y transporte axonal, donde la integridad de los microtúbulos es esencial.
α1b Tubulin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TUBA1B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TUBA1B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TUBA1B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TUBA1B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.