Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
α1a Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400022
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- α1a Tubulin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico α1a Tubulin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: α1a Tubulin Anticuerpo (7-RY28): sc-134237
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
α1a Tubulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400022 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TUBA1A codifica la tubulina α1a, un isotipo central de α-tubulina que forma heterodímeros con la β-tubulina para ensamblar microtúbulos, sosteniendo la arquitectura del citoesqueleto, el transporte intracelular y la función del huso mitótico. La dinámica de los microtúbulos, regulada por la composición de α/β-tubulina y por proteínas asociadas, coordina procesos como la migración neuronal, la guía axonal y el tráfico de vesículas. TUBA1A se expresa de forma enriquecida en el sistema nervioso en desarrollo, y las alteraciones en la polimerización o la estabilidad de los microtúbulos pueden perturbar los programas de desarrollo cortical. Las variantes patogénicas en TUBA1A se asocian con tubulinopatías y trastornos del neurodesarrollo caracterizados por malformaciones del desarrollo cortical y una conectividad neuronal alterada.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO α1a Tubulin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TUBA1A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TUBA1A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TUBA1A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína α1a Tubulin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TUBA1A para la investigación de la señalización de α1a Tubulin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TUBA1A críticos para la función de α1a Tubulin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TUBA1A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido α1a Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido α1a Tubulin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TUBA1A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR α1a Tubulin (h) y el plásmido HDR α1a Tubulin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TUBA1A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TUBA1A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.