ZMYM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407092

Übersicht

ZMYM1 (Zinkfingerprotein vom MYM-Typ 1) ist ein nukleärer Transkriptionsregulator, der an der chromatinabhängigen Kontrolle der Genexpression beteiligt ist. Über seine Zinkfinger-Architektur und die Interaktion mit Korepressor-Komplexen trägt ZMYM1 zur Transkriptionsrepression, zur Aufrechterhaltung epigenetischer Zustände sowie zur Koordination von Programmen bei, die mit Zellzyklusprogression und DNA-Schadensantworten verknüpft sind. Eine fehlregulierte ZMYM1-Aktivität wurde mit veränderten Transkriptionsnetzwerken in Verbindung gebracht, wie sie bei Krebs und anderen Erkrankungen auftreten, bei denen die Chromatinregulation gestört ist, was ZMYM1 für mechanistische Studien der Genkontrolle in menschlichen Zellen relevant macht.

Das ZMYM1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ZMYM1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ZMYM1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ZMYM1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ZMYM1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ZMYM1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ZMYM1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ZMYM1-Exone abzielen, die für die ZMYM1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ZMYM1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ZMYM1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ZMYM1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ZMYM1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ZMYM1 HDR-Plasmid (h) und ZMYM1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ZMYM1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ZMYM1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.