ZHX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-436490

Übersicht

Zhx2 kodiert das Protein „zinc fingers and homeoboxes 2“ (ZHX2), einen nukleären Transkriptionsfaktor, der je nach Kontext als Regulator der Genexpression wirken kann – über DNA-Bindung und durch Interaktionen mit anderen transkriptionellen Repressoren. In Mausgeweben wird ZHX2 mit Programmen der Differenzierung und Reifung von Hepatozyten sowie mit der Kontrolle leberangereicherter metabolischer Gennetzwerke in Verbindung gebracht, darunter Signalwege, die an Lipidstoffwechsel und Xenobiotika-Verarbeitung beteiligt sind. Eine veränderte ZHX2-Aktivität wurde mit fehlregulierten Transkriptionsprogrammen assoziiert, die für Entzündung und Tumorbiologie relevant sind, was ZHX2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung der transkriptionellen Kontrolle der Gewebehomöostase macht. Diese Eigenschaften sprechen für die Untersuchung ZHX2-abhängiger chromatinbasierter und transkriptioneller Mechanismen in Entwicklung sowie in krankheitsrelevanten zellulären Zuständen.

Das ZHX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Zhx2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Zhx2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Zhx2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ZHX2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Zhx2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ZHX2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Zhx2-Exone abzielen, die für die ZHX2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Zhx2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ZHX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom ZHX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Zhx2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ZHX2 HDR-Plasmid (m) und ZHX2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Zhx2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Zhx2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.