ZHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-436490

概要

Zhx2 は、ジンクフィンガーおよびホメオボックスを有するタンパク質2（ZHX2）をコードしており、ZHX2 は核内転写因子として、DNA 結合や他の転写抑制因子との相互作用を介して、状況依存的に遺伝子発現を制御し得ます。マウス組織では、ZHX2 は肝細胞の分化・成熟プログラムや、脂質代謝や異物（キセノバイオティクス）処理に関連する経路を含む、肝臓特異的な代謝遺伝子ネットワークの制御に関与することが示唆されています。ZHX2 活性の変化は、炎症や腫瘍生物学に関連する転写プログラムの破綻と関連づけられており、組織恒常性の転写制御を研究するうえで有用な結節点（ノード）となります。これらの特性は、発生や疾患関連の細胞状態における ZHX2 依存的なクロマチンおよび転写メカニズムの解明を後押しします。

ZHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZhx2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zhx2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zhx2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZHX2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZHX2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zhx2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZHX2の機能に不可欠なZhx2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zhx2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zhx2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZHX2 HDRプラスミド（m）および ZHX2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZhx2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZhx2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。