ZCCHC3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-426824

Panoramica

Zcchc3 codifica ZCCHC3, una proteina a dita di zinco di tipo CCCH implicata nel riconoscimento citosolico degli acidi nucleici e nella regolazione della segnalazione immunitaria innata. Le funzioni riportate collegano ZCCHC3 alle vie di difesa antivirale, inclusa la modulazione delle risposte associate a RIG-I/MDA5 e cGAS–STING, che modellano i programmi genici dell’interferone di tipo I e dell’infiammazione. Influenzando la segnalazione innescata da RNA/DNA e gli output trascrizionali a valle, ZCCHC3 può alterare le risposte cellulari all’infezione e allo stress immunitario. La disregolazione di questi processi è rilevante per studi su fenotipi infiammatori e interazioni ospite–patogeno in modelli murini.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZCCHC3 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Zcchc3 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Zcchc3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Zcchc3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZCCHC3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Zcchc3 per lo studio della segnalazione di ZCCHC3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Zcchc3 critici per la funzione di ZCCHC3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Zcchc3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZCCHC3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ZCCHC3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Zcchc3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZCCHC3 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ZCCHC3 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Zcchc3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Zcchc3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.