Plasmide Double Nickase (m) ZC3H14: sc-429118-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ZC3H14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZC3H14 Double Nickase (m) et le plasmide ZC3H14 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Zc3h14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ZC3H14 | sc-429118-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Zc3h14** code **ZC3H14**, une protéine de liaison à l’ARN à doigt de zinc de type CCCH qui s’associe à l’ARN poly(A) et régule le contrôle post‑transcriptionnel des gènes en agissant sur la polyadénylation, la stabilité et la traduction des ARNm. ZC3H14 contribue à des programmes de maturation des ARN qui façonnent l’expression génique au cours du développement neuronal et du fonctionnement synaptique, la reliant à des voies plus larges du métabolisme des ARNm dans le noyau et le cytoplasme. La perturbation des orthologues de ZC3H14 a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des modifications de l’expression des gènes neuronaux, ce qui en fait un facteur pertinent pour des études mécanistiques de la régulation de l’ARN dans des types cellulaires pertinents pour le cerveau. En tant que régulateur conservé du devenir des ARNm, ZC3H14 est fréquemment étudiée dans des modèles de différenciation neuronale, de dynamique des granules d’ARN et d’homéostasie des longueurs de queues poly(A) à l’échelle du transcriptome.
ZC3H14 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Zc3h14 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Zc3h14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Zc3h14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Zc3h14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.