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ZBTB11 Double Nickase Plasmid (h) | sc-411959-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZBTB11 kodiert einen Zinkfinger-Transkriptionsfaktor mit BTB/POZ-Domäne, der an der chromatinassoziierten Genregulation und der Aufrechterhaltung angemessener Transkriptionsprogramme beteiligt ist. Durch sequenzspezifische DNA-Bindung und die Rekrutierung von Korepressor- oder chromatinmodifizierenden Komplexen beeinflusst ZBTB11 zelluläre Prozesse wie Proliferation, Differenzierung und stressresponsive Transkription. Störungen von BTB-Zinkfinger-Transkriptionsregulatoren können epigenetische Zustände umgestalten und Signalwege beeinflussen, die mit der Genomstabilität verknüpft sind, wodurch ZBTB11 ein nützlicher Knotenpunkt für die Untersuchung der Transkriptionskontrolle in menschlichen Zellen ist. Fehlregulierte Transkriptionsfaktor-Netzwerke unter Beteiligung von ZBTB-Familienproteinen wurden mit onkogenen und entwicklungsbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht; dies stützt die Forschung an krankheitsrelevanten regulatorischen Schaltkreisen, ohne dabei einen klinischen Nutzen zu implizieren.
ZBTB11 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ZBTB11-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ZBTB11 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ZBTB11-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ZBTB11-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.