ZBP1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-425482-LAC

Das murine Gen **Zbp1** kodiert **ZBP1** (Z‑DNA‑bindendes Protein 1), einen zytosolischen Nukleinsäuresensor, der Nukleinsäuren in **Z‑Form** erkennt und pathogen- sowie schadenassoziierte Signale mit der Aktivierung der angeborenen Immunantwort verknüpft. ZBP1 vermittelt **RHIM‑abhängige** Signalübertragung mit **RIPK1/RIPK3**, um inflammatorische Transkriptionsprogramme und Signalwege des programmierten Zelltods, einschließlich der **Nekroptose**, zu regulieren, und steht zudem in Verbindung mit interferongetriebenen Antworten. Über diese Mechanismen beeinflusst ZBP1 die antivirale Restriktion sowie das Gleichgewicht zwischen Zellüberleben und entzündlichem Zelltod – Prozesse, die für Infektionsbiologie und Immunpathologie relevant sind. Eine fehlregulierte ZBP1‑Signalgebung wird mit aberranter Entzündung und gestörter Kontrolle des Zelltods in Zusammenhang gebracht, was ZBP1 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Analyse der Schaltkreise der angeborenen Immunität in Mausmodellen macht.

ZBP1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Zbp1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ZBP1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Zbp1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ZBP1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Zbp1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.