ZAP 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-429710-NIC
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- ZAP Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- ZAP 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 ZAP 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 Zc3hav1을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
ZAP 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-429710-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZAP 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2) | sc-429710-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
마우스 Zc3hav1 유전자는 아연손가락 항바이러스 단백질(ZAP)을 암호화한다. ZAP은 인터페론에 의해 유도되는 RNA 결합 인자로, CpG가 풍부한 바이러스 전사체를 인식하고 그 분해를 촉진함으로써 다양한 RNA 바이러스를 제한한다. ZAP은 RNA 분해 및 번역 조절 경로를 동원하고, TRIM25와 같은 E3 유비퀴틴 리가아제 복합체와 상호작용하여 제한 효과를 증폭함으로써 항바이러스 선천면역 신호를 조율한다. 이러한 활동을 통해 ZAP은 감염과 염증에 대한 세포 반응을 형성하는 데 기여하며, 인터페론 구동 전사 프로그램과 스트레스 연관 RNA 대사에도 영향을 미친다. ZAP 활성의 변화는 바이러스 감수성 차이와 연관된 것으로 보고되었고, 감염생물학 및 숙주–병원체 상호작용과 관련된 면역 관련 표현형을 조절할 수 있다.
ZAP 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Zc3hav1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Zc3hav1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Zc3hav1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Zc3hav1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.