Partículas Lentivirales de Activación (m) YAP: sc-423742-LAC

El gen murino **Yap1** codifica el coactivador transcripcional **YAP**, un efector central de la vía de señalización **Hippo** que integra señales mecánicas, la polaridad celular y la actividad de quinasas aguas arriba para regular la proliferación, la supervivencia y el control del tamaño de los órganos. Cuando la señalización Hippo se atenúa, YAP se acumula en el núcleo y se asocia con factores de transcripción de la familia **TEAD** para activar programas génicos vinculados a la transición epitelio–mesénquima, el mantenimiento de células madre/progenitoras y la remodelación de la matriz extracelular. La actividad de YAP se interconecta con las vías **Wnt/β-catenina**, **TGF-β/SMAD**, **GPCR** y **PI3K–AKT**, modelando salidas transcripcionales dependientes del contexto en múltiples tejidos. La señalización de YAP desregulada se utiliza ampliamente como eje mecanístico en modelos de fibrosis, regeneración tisular y transformación oncogénica, lo que convierte a **Yap1** en un nodo de alto valor para el análisis de vías en investigación biomédica en ratón.

Las partículas de activación lentiviral YAP (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Yap1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral YAP (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Yap1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de YAP. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Yap1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.