Plásmido Doble Nickase (m) XRCC1: sc-423738-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)XRCC1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa XRCC1 (m) y el plásmido de doble nickasa XRCC1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Xrcc1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) XRCC1 | sc-423738-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Xrcc1 de ratón codifica XRCC1, una proteína de andamiaje que coordina la reparación por escisión de bases y la reparación de roturas de cadena sencilla al ensamblar factores como la ligasa de ADN III, POLβ y PARP1 en los sitios de daño. XRCC1 contribuye al mantenimiento del genoma durante la replicación y la transcripción al promover el procesamiento oportuno y el sellado de las interrupciones en las hebras de ADN, limitando así las aberraciones cromosómicas y el estrés replicativo. La alteración de la reparación dependiente de XRCC1 incrementa la señalización de daño en el ADN y puede sensibilizar a las células frente a lesiones oxidativas endógenas y agresiones genotóxicas, vinculando esta vía con mecanismos de mutagénesis e inestabilidad genómica relevantes para fenotipos asociados a enfermedad en diversos tejidos.
XRCC1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Xrcc1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Xrcc1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Xrcc1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Xrcc1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.