Plasmide Double Nickase (h) Xanthine Oxidase: sc-401185-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Xanthine Oxidase correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Xanthine Oxidase Double Nickase (h) et le plasmide Xanthine Oxidase Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant XDH. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Xanthine Oxidase Antibody (A-3): sc-398548
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Xanthine Oxidase | sc-401185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Xanthine Oxidase | sc-401185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XDH code la xanthine oxydase, une oxydoréductase contenant du molybdène qui catalyse les étapes terminales du catabolisme des purines en convertissant l’hypoxanthine en xanthine puis la xanthine en acide urique. Au cours de ces réactions, l’enzyme peut générer des espèces réactives de l’oxygène, reliant l’activité de XDH à l’homéostasie rédox, à la signalisation du stress oxydant et aux réponses inflammatoires. La fonction de la xanthine oxydase recoupe des voies d’adaptation métabolique et des processus de lésion tissulaire dans lesquels le renouvellement des purines et la production d’oxydants sont accrus. Une expression ou une activité dérégulée de XDH a été associée à des mécanismes liés à l’hyperuricémie, à la dysfonction endothéliale et à des dommages oxydatifs dans des contextes de maladies cardiométaboliques et inflammatoires, ce qui étaye son utilisation comme cible mécanistique dans la recherche sur le métabolisme et les réponses au stress.
Xanthine Oxidase Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus XDH dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de XDH. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de XDH. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de XDH.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.