Plasmide Double Nickase (h) Wnt-8b: sc-405077-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Wnt-8b correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Wnt-8b Double Nickase (h) et le plasmide Wnt-8b Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant WNT8B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Wnt-8b | sc-405077-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Wnt-8b | sc-405077-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WNT8B code pour la glycoprotéine sécrétée Wnt-8b, un ligand qui initie la signalisation canonique Wnt/β-caténine via les co-récepteurs Frizzled et LRP5/6 afin de réguler la spécification du destin cellulaire, la prolifération et la mise en place des patrons tissulaires. L’activité de Wnt-8b contribue à la formation de gradients morphogénétiques et à des programmes transcriptionnels médiés par TCF/LEF, influençant des processus du neurodéveloppement, notamment la régionalisation du prosencéphale et du mésencéphale. Une expression dérégulée de WNT8B ou un déséquilibre de la voie a été associé à des états de différenciation altérés et à une signalisation de croissance aberrante observés dans plusieurs contextes pathologiques, ce qui soutient son utilisation comme nœud mécanistique dans la biologie dépendante de Wnt. En tant que ligand sécrété de la voie, Wnt-8b est fréquemment étudié pour ses effets sur la signalisation paracrine, les phénotypes de type « cellules souches » et le dialogue (cross-talk) avec les voies MAPK et PI3K/AKT.
Wnt-8b Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus WNT8B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de WNT8B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de WNT8B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de WNT8B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.