Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Wnt-1 (h): sc-400982
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Wnt-1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Wnt-1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Wnt-1 Antibody (E-10): sc-514531
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Wnt-1 (h) | sc-400982 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
WNT1 code la protéine Wnt‑1, une glycoprotéine sécrétée qui agit comme morphogène et comme ligand des récepteurs Frizzled/LRP afin d’activer la voie canonique Wnt/β‑caténine. En régulant la stabilisation de la β‑caténine et la transcription dépendante de TCF/LEF, Wnt‑1 influence la spécification du destin cellulaire, la prolifération et la différenciation au cours du développement et du maintien de l’homéostasie tissulaire. L’activité de WNT1 interagit avec des voies contrôlant l’organisation épithéliale et les programmes des cellules progénitrices, et la dérégulation de la signalisation Wnt est largement impliquée dans la transformation oncogénique et les anomalies du contrôle de la croissance. Des variants de WNT1 ont également été associés à la biologie du squelette et à des phénotypes de formation osseuse, ce qui confirme sa pertinence pour la recherche en développement et en régénération.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Wnt-1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène WNT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du WNT1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert WNT1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Wnt-1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en WNT1 pour l'étude de la signalisation de Wnt-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de WNT1 essentiels à la fonction de Wnt-1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de WNT1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Wnt-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Wnt-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus WNT1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Wnt-1 plasmide HDR (h) et le Wnt-1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie WNT1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles WNT1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.