VPS35 HDR-Plasmid (h): sc-402019-HDR. Western Blot Analyse der VPS35 Expression in nicht-transfizierten Kontroll (A) und Puromycin-behandelten, VPS35 CRISPR/Cas9 KO Plasmid plus VPS35 HDR Plasmid kotransfizierten (B) HEK 293T Ganzzell-Lysaten. Der Blot wurde mit VPS35 (B-5): sc-374372 sondiert. α-Actinin (H-2): sc-17829 dient als Spezifitäts- und Ladekontrolle.
VPS35 CRISPR Plasmide (h)
- Zielspezies: human
- CRISPR/Cas9 KO Plasmide bestehen ausVPS35-spezifischen 20 nt guide RNA Sequenzen, die aus der GeCKO (v2) Datenbank stammen
- gRNA Sequenzen leiten die Cas9 Endonuklease spezifisch, um einen gezielten Doppelstrangbruch (DSB) in der genomischen DNA herbeizuführen
- Gen-spezifische CRISPR Plasmide sowohl für den Knockout als auch für die Aktivierung von Genen sind verfügbar. Detaillierte Produktinformation finden Sie im hier below
- Zur Überprüfung der Herunterregulation oder einer Aktivierung des Gens empfehlen wir die Verwendung des VPS35 Antikörpers (B-5): sc-374372
- Alle Produkte werden als transfektions-fertige, aufgereinigte Plasmid DNA angeboten mit Ausnahme der Lentiviralen Aktivierungs Partikel, welche speziell für die Verwendung auf schwer zu transfizierenden Zellen als Lentivirale Partikel verpackt worden sind.
Direktverknüpfungen
Bestellinformation
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
Double Nickase Plasmide
CRISPR Aktivierungs-Plasmide
Empfohlene Produkte für Kontrollexperimente
Siehe auch...
VPS Antikörper zur Analyse zellulärer Reaktionen auf VPS CRISPR-Produkte
Erfahren Sie mehr über das CRISPR System
CRISPR/Cas9 KO Plasmide, Double Nickase Plasmide und CRISPR/dCas9 Aktivierungs-Plasmide sind "Lizenzprodukte" deren Verwendung einer beschränkten Lizenz/Label unterliegt klicken Sie hier.
Beschreibung
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- VPS35 CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid (h) besteht aus einem Gemisch aus drei Plasmiden, die jeweils für die Cas9 Nuklease und eine VPS35-spezifische 20 nt guide RNA (gRNA) kodieren, um maximale Knockout Effizienz zu gewährleisten.
- gRNA Sequenzen wurden aus der GeCKO (v2) Bibliothek abgeleitet. Sie leiten das Cas9 Protein zum entsprechenden Zielgen, wo das Enzym einen spezifischen Doppelstrangbruch (DSB) der genomischen DNA verursacht.
- Um die Zellen, bei denen ein Doppel-Strang-Bruch (DSB) erfolgreich über Cas9 induziert worden ist, zu selektieren, ist eine Co-Transfektion mit dem VPS35 HDR Plasmid (h) (sc-402019-HDR) empfohlen
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: VPS35: sc-374372
Sehen Protokoll Online.
DOWNLOADS
Direktverknüpfungen
Ähnliche Produkte
Beschreibung
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- VPS35 HDR Plasmid (h) ist für die Co-Transfektion mit dem VPS35 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) empfohlen
- VPS35 HDR Plasmid (h) wird als Gemisch bestehend aus zwei bis drei Vektor-Plasmiden geliefert. Die einzelnen Vektor-Plasmide kodieren jeweils für eine zielspezifische Matrize zur homologen Rekombination (HDR) an den entsprechenden Schnittstellen, die erzeugt wurden vom VPS35 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h)
- Jede HDR Matrize kodiert für zwei 800 bp Homologiearme, welche spezifisch links und rechts an die umliegende genomische DNA des entsprechenden von Cas9-induzierten DNA-Doppelstrangbruchs (DSB) binden.
- Das HDR Plasmid enthält ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen und ein RFP (rotes Fluoreszenz-Protein) zur visuellen Bestätigung der Transfektion. Puromycin dihydrochlorid (CAS 58-58-2) sc-108071 ist erhältlich als Gebinde zu je 25 mg, 50mg, 250mg oder 1g.
- Die Gene für Puromycinresistenz und RFP werden von zwei LoxP sites flankiert, die ein weiteres Prozessieren durch den Cre Vector sc-418923 ermöglichen
Sehen Protokoll Online.
DOWNLOADS
Direktverknüpfungen
Ähnliche Produkte
Beschreibung
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das VPS35 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Die beiden gRNA-Sequenzen der VPS35 Double Nickase Plasmid (h2) unterscheiden sich von den beiden gRNA-Sequenzen der VPS35 Double Nickase Plasmid (h)
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: VPS35: sc-374372
Sehen Protokoll Online.
DOWNLOADS
Direktverknüpfungen
Ähnliche Produkte
Beschreibung
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- VPS35 CRISPR Activation Plasmid (h) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
- VPS35 CRISPR Aktivierungsplasmide (h) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Nach der Transfektion kann die Effizienz der Genaktivierung per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: VPS35 Antibody (B-5): sc-374372
Sehen Protokoll Online.
DOWNLOADS
Direktverknüpfungen
Ähnliche Produkte
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
VPS35 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-402019 | 20 µg | $397.00 | |||
VPS35 HDR Plasmid (h) | sc-402019-HDR | 20 µg | $445.00 | |||
VPS35 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402019-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VPS35 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402019-NIC-2 | 20 µg | $410.00 | |||
VPS35 CRISPR Activation Plasmid (h) | sc-402019-ACT | 20 µg | $397.00 |