VEZF1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-423670-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- VEZF1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- VEZF1ダブルニカースプラスミド（m）およびVEZF1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Vezf1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
VEZF1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-423670-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VEZF1 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-423670-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Vezf1はVEZF1をコードしており、VEZF1は亜鉛フィンガー型のDNA結合転写因子です。内皮系および造血系の文脈で高く発現し、血管発生や血管パターニングの協調的な制御に寄与します。VEZF1は、血管新生、内皮分化、クロマチン関連の転写制御に結び付いた遺伝子発現プログラムを調節し、血管の完全性や組織灌流を形成する経路と連携します。マウスモデルでは、Vezf1活性の変化が血管形態形成や胚の生存性に影響することから、発生期の血管異常や内皮機能障害の基盤となる機序を研究するうえで重要です。さらに、その転写機能は、血管の遺伝子制御ネットワークが病的血管新生や炎症に伴う血管リモデリングにどのように関与するかを、実験的な疾患モデルで検討する際にも有用です。
VEZF1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Vezf1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Vezf1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Vezf1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Vezf1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。