Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO VEGF (m): sc-423665
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- VEGF Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique VEGF, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: VEGF Antibody (C-1): sc-7269
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO VEGF (m) | sc-423665 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Vegfa code le facteur de croissance de l’endothélium vasculaire (VEGF), une cytokine sécrétée qui stimule la prolifération, la migration et la survie des cellules endothéliales lors de la vasculogenèse embryonnaire et de l’angiogenèse postnatale. La signalisation du VEGF mobilise principalement VEGFR2 pour activer les voies PI3K–AKT, MAPK/ERK, PLCγ–PKC et de l’oxyde nitrique, coordonnant la perméabilité vasculaire et la perfusion tissulaire en réponse à l’hypoxie via une régulation dépendante de HIF. Dans des modèles murins, des modifications du dosage de Vegfa influencent l’architecture des vaisseaux, la réparation des plaies et le remodelage tissulaire inflammatoire. Une signalisation VEGF dérégulée est largement étudiée dans des contextes tels que l’angiogenèse associée aux tumeurs, la néovascularisation rétinienne et l’adaptation vasculaire liée à l’ischémie, sans présumer de retombées thérapeutiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO VEGF (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Vegfa dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Vegfa, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Vegfa à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine VEGF.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Vegfa pour l'étude de la signalisation de VEGF, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Vegfa essentiels à la fonction de VEGF
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Vegfa pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le VEGF plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le VEGF plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Vegfa. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le VEGF plasmide HDR (m) et le VEGF (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Vegfa pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Vegfa définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.